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使用尺寸排阻色譜柱時,需要注意以下幾個關鍵事項

更新時間:2024-05-23點擊次數:218
  尺寸排阻色譜柱是一種廣泛應用于生物分析領域的工具,其工作原理主要基于分子大小差異進行分離。利用柱內固定相中孔隙與分子間的物理作用來實現分離。具體來說,聚合物分子在柱子中的孔道中被篩選,較大的分子無法通過尺寸較小的孔道,只有較小的分子才能通過這些孔道,從而實現不同分子尺寸的分離。
  使用尺寸排阻色譜柱時,需要注意以下幾個關鍵事項:
  1、流動相的選擇:流動相應根據樣品的溶解性來選擇,它應與凝膠本身具有相似性,同時要求黏度低,與樣品的折光率有較大差異。這樣可以確保流動相能夠潤濕凝膠并防止吸附作用的發(fā)生。
  2、進樣量控制:對于體積排阻色譜來說,進樣量不宜超過柱體積的5%。例如,一根規(guī)格為300 x 7.8mm的色譜柱的柱體積約為14mL,因此進樣量不應超過700uL??刂七m當的進樣量是保證分離效果和避免柱子過載的重要條件。
  3、樣品的準備:在注入樣品之前,需要確保樣品已經被適當地溶解并且過濾,以避免固體顆?;蛭慈芙獾奈镔|對色譜柱造成損害。
  4、溫度的控制:尺寸排阻色譜通常需要在恒溫條件下進行,以保持色譜柱的穩(wěn)定性和提高分離效率。
  5、色譜柱的維護:使用后應及時清洗色譜柱,以去除殘留的樣品和流動相,防止柱內發(fā)生堵塞或微生物生長。
  6、系統(tǒng)監(jiān)測:在操作過程中,應密切監(jiān)控系統(tǒng)壓力和檢測器響應,以便及時發(fā)現任何異常情況并采取相應措施。
  綜上所述,通過遵循這些注意事項,可以確保尺寸排阻色譜柱的有效使用,同時也能延長其使用壽命,獲得可靠的分析結果。在進行實驗前,還應仔細閱讀色譜柱的使用說明書,以了解更詳細的操作指南和建議。

上一個:尺寸排阻色譜柱其應用是非常廣泛的

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